本發(fā)明屬于植物基因工程,具體涉及柑橘cserf017基因在驅(qū)避柑橘木虱中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、柑橘是非常重要的經(jīng)濟(jì)作物,在全世界分布廣泛。柑橘黃龍病(citrushuanglongbing,hlb)是由韌皮部桿菌屬candidatus?liberibacter細(xì)菌引起的全球性柑橘重大病害,在田間主要由柑橘木虱diaphorina?citri傳播。?目前在柑橘生產(chǎn)中對(duì)柑橘木虱的防治方法主要集中在物理、化學(xué)和生物防治等方面,然而這些方法無論是實(shí)用性還是經(jīng)濟(jì)性尚不理想,因此培育抗木虱柑橘品種被認(rèn)為是防治木虱的最優(yōu)方案。
2、申請(qǐng)者在前期研究中利用rna-seq技術(shù),以柑橘品種----甜橙為材料,對(duì)被柑橘木虱取食前后的甜橙葉片的全局轉(zhuǎn)錄組變化進(jìn)行了評(píng)估,鑒定出在木虱取食前后的重要差異表達(dá)基因。通過挖掘柑橘中驅(qū)避木虱的相關(guān)功能基因,明確其對(duì)木虱的行為調(diào)控,可為培育抗木虱柑橘品種提供重要的基因資源和有力的理論支撐。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供了一種柑橘cserf017基因及其在驅(qū)避柑橘木虱中的應(yīng)用。本發(fā)明從柑橘品種甜橙(citrus?sinensis)中鑒定到一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子cserf017,該基因的表達(dá)受柑橘木虱取食強(qiáng)烈誘導(dǎo)下調(diào),通過利用基因過表達(dá)技術(shù)增強(qiáng)cserf017基因的表達(dá),從而使其表現(xiàn)出cserf017基因表達(dá)水平增強(qiáng)的表型。結(jié)果發(fā)現(xiàn):相比對(duì)照檸檬植株,柑橘木虱對(duì)cserf017瞬時(shí)過量表達(dá)檸檬植株具有很弱的趨向性,由此說明cserf017是一個(gè)具有驅(qū)避柑橘木虱能力的基因。該研究結(jié)果揭示cserf017能夠參與柑橘木虱誘導(dǎo)的防御反應(yīng),可以作為培育抗木虱柑橘品種的候選基因。
2、因此,本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在驅(qū)避柑橘木虱中的應(yīng)用,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
3、上述cserf017基因編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。應(yīng)當(dāng)理解,在不影響上述的cserf017轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)和活性的前提下,本領(lǐng)域技術(shù)人員可對(duì)seq?id?no.2所示的氨基酸序列進(jìn)行各種取代、添加和(或)缺失一個(gè)或幾個(gè)氨基酸獲得具有同等功能的蛋白。
4、本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在培育抗蟲植物中的應(yīng)用,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。優(yōu)選的,是在培育抗柑橘木虱的植物中的應(yīng)用。優(yōu)選的,所述的植物為柑橘屬植物。
5、本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在植物種質(zhì)資源改良中的應(yīng)用,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。優(yōu)選的,是在提高植物抗柑橘木虱的種質(zhì)資源改良中的應(yīng)用。優(yōu)選的,所述的植物為柑橘屬植物。
6、本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證明,過量表達(dá)cserf017基因會(huì)降低柑橘木虱對(duì)檸檬植株的趨向性。因此,本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供一種降低柑橘木虱對(duì)植物趨向性的方法,通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)過量表達(dá)柑橘cserf017基因,所述的cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。優(yōu)選的,所述的植物為柑橘屬植物。
7、本發(fā)明公開了柑橘品種甜橙的cserf017基因在柑橘抗木虱育種中的應(yīng)用。本發(fā)明成功克隆了甜橙的cserf017基因,并發(fā)現(xiàn)柑橘木虱對(duì)cserf017瞬時(shí)過量表達(dá)檸檬植株具有很弱的趨向性,進(jìn)而說明cserf017是一個(gè)具有驅(qū)避柑橘木虱能力的基因,因此該基因可以作為培育抗木虱柑橘品種的重要候選基因。本發(fā)明可為培育抗木虱柑橘品種提供重要的基因資源和有力的理論支撐。
1.柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在驅(qū)避柑橘木虱中的應(yīng)用,其特征在于,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述cserf017基因編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。
3.柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在培育抗蟲植物中的應(yīng)用,其特征在于,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于,所述培育抗蟲植物是培育抗柑橘木虱的植物。
5.柑橘cserf017基因或包含該基因的生物材料在植物種質(zhì)資源改良中的應(yīng)用,其特征在于,所述cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物種質(zhì)資源改良是提高植物抗柑橘木虱的種質(zhì)資源改良。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、3或5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述生物材料為表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系。
8.根據(jù)權(quán)利要求3或5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物為柑橘屬植物。
9.一種降低柑橘木虱對(duì)植物趨向性的方法,其特征在于,通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)過量表達(dá)柑橘cserf017基因,所述的cserf017基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述的植物為柑橘屬植物。