本發(fā)明屬于醫(yī)藥，具體涉及一類含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針、其制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、氨基酸代謝是癌細(xì)胞用于維持生長(zhǎng)繁殖的主要代謝途徑之一，其對(duì)氧化還原的調(diào)節(jié)、生物合成途徑的維持、表觀遺傳物質(zhì)修飾的調(diào)節(jié)、代謝中間體的合成有重要作用。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)中，絲氨酸是繼葡萄糖和谷氨酰胺之后的第三大代謝物，在所有氨基酸中位居第二位。絲氨酸能夠促進(jìn)用于支持正常細(xì)胞增殖分化代謝所需能量的生成以及許多生物大分子的合成，可以提供參與各種生化途徑的分子的構(gòu)建塊，這些分子包括氨基酸、脂質(zhì)、核苷酸和輔助因子等。

2、磷酸甘油酸脫氫酶(phosphoglycerate?dehydrogenase,phgdh)作為絲氨酸合成途徑中的限速酶，與多種腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。在ssp途徑中，phgdh使用nad+作為輔因子，將糖酵解中間體3-pg氧化成3-php，隨后經(jīng)psat的轉(zhuǎn)胺作用與psph的去磷酸化作用轉(zhuǎn)化為用于提供各種生化途徑分子構(gòu)建塊的絲氨酸。同時(shí)，由于phgdh具有底物雜亂性，所以也可參與其他生理過(guò)程，如通過(guò)加速nadh依賴的α-酮戊二酸(α-kg)還原生成致癌代謝物d-2-羥基戊二酸，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。近年來(lái)，關(guān)于phgdh靶點(diǎn)的藥理研究多集中在其高表達(dá)方面，目前該靶點(diǎn)已被發(fā)現(xiàn)在乳腺癌、黑色素瘤、肝癌、肺癌和白血病等多種腫瘤中發(fā)生表達(dá)上調(diào)。目前，phdgh已逐漸成為靶向藥物發(fā)現(xiàn)的新方向。

3、在靶向藥物開(kāi)發(fā)中，click生物正交反應(yīng)技術(shù)成為一種重要的工具，用于靶向蛋白的高效標(biāo)記和靶點(diǎn)鑒定。click反應(yīng)是一種高效、選擇性強(qiáng)的化學(xué)反應(yīng)，能夠在不干擾生物體系的前提下，與目標(biāo)蛋白或其他生物大分子特異性地發(fā)生反應(yīng)。click反應(yīng)的原理基于“點(diǎn)擊化學(xué)”反應(yīng)，通過(guò)炔基和疊氮基的相互作用實(shí)現(xiàn)標(biāo)記，廣泛應(yīng)用于小分子藥物篩選、蛋白質(zhì)互作研究以及藥物靶點(diǎn)鑒定。

4、發(fā)明人所在課題組此前設(shè)計(jì)合成了大量具有硫醚骨架的化合物，經(jīng)過(guò)篩選和結(jié)構(gòu)修飾，獲得了一系列新的click反應(yīng)探針。這些新型硫醚骨架探針能夠通過(guò)click技術(shù)高效地進(jìn)行靶向phgdh蛋白的鑒定，豐富了phgdh分子活性探針的結(jié)構(gòu)類型，具有較高的特異性和活性，可以用于進(jìn)一步篩選靶向phgdh的抑制劑，并揭示其在細(xì)胞內(nèi)的作用機(jī)制。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的空白，提供一類含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針、其制備方法及其應(yīng)用。

2、發(fā)明人通過(guò)篩選化合物庫(kù)以及結(jié)構(gòu)改造，得到了一系列結(jié)構(gòu)新穎、活性較強(qiáng)的硫醚骨架新型phgdh分子探針，可以鑒定靶向phgdh抑制劑與蛋白相互作用。發(fā)明人設(shè)計(jì)合成了大量硫醚骨架化合物，通過(guò)篩選該化合物庫(kù)，并對(duì)部分化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，獲得了一類能夠進(jìn)行基于click生物正交反應(yīng)方法進(jìn)行靶向phgdh靶點(diǎn)鑒定的新型硫醚骨架探針，豐富了phgdh分子活性探針的結(jié)構(gòu)類型。

3、本發(fā)明解決技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：

4、在本發(fā)明的第一方面，提供了一類含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針，其具有如式(i)所示結(jié)構(gòu)：

5、

6、其中：

7、r1選自氫原子、硝基、氰基、羧基或三氟甲基等強(qiáng)吸電子基團(tuán)中的任意一種；

8、a片段和b片段均為取代或非取代的芳香環(huán)或芳雜環(huán)，芳香環(huán)及芳雜環(huán)可以包括呋喃、吡啶、吡唑、噻唑、噻二唑、惡唑、四氮唑等五元或六元中的任意一種，取代基為單取代或多取代的烷基、烷氧基、硝基、鹵素、三氟甲基、羰基、苯甲?；哙?、苯甲酰胺基團(tuán)、酰胺、苯基甲酮等中的任意一種；a片段和b片段相同或不同；

9、linker為長(zhǎng)度可調(diào)節(jié)的鏈接分子，該連接鏈主鏈原子選自碳、氮或氧原子，包括但不僅限于柔性peg鏈、飽和碳鏈或不飽和碳鏈，鏈長(zhǎng)度可調(diào)整；

10、c代表可用于鑒定蛋白靶標(biāo)的報(bào)告基團(tuán)，如fitc等熒光基團(tuán)、生物素、可進(jìn)行生物正交click反應(yīng)的疊氮化物和炔基等，以及可進(jìn)行反電子需求diels-alder反應(yīng)中的張力烯烴和四嗪中的任意一種。

11、優(yōu)選地，式(i)中，

12、r1為硝基、氰基、三氟甲基中的任意一種；

13、a選自呋喃、吡唑、噻唑、噻二唑或惡唑中的任意一種；

14、b選自噻唑基苯基甲酮、噻唑基苯甲?；哙?、噻唑基苯甲酰胺、噻二唑基酰胺、噻唑基酰胺中的任意一種；

15、linker選自飽和碳鏈或不飽和碳鏈；

16、c選自可進(jìn)行生物正交click反應(yīng)的疊氮化物和炔基等，以及可進(jìn)行反電子需求diels-alder反應(yīng)中的張力烯烴和四嗪中的任意一種。

17、更優(yōu)選地，式(i)中，

18、r1為硝基；

19、a為噻唑基或惡唑基；

20、b選自：噻唑基苯基甲酮、噻唑基苯甲酰胺、噻二唑基酰胺、噻唑基酰胺中的任意一種；

21、linker選自飽和碳鏈，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，戊基中的任意一種；

22、c選自可進(jìn)行生物正交click反應(yīng)的疊氮化物和炔基，以及可進(jìn)行反電子需求diels-alder反應(yīng)中的張力烯烴中的任意一種。

23、在本發(fā)明的一些最優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述的分子探針選自以下幾種化合物中的任意一種：

24、

25、

26、在本發(fā)明的第二方面，提供了如式(i)所示結(jié)構(gòu)的一類含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針的制備方法，可通過(guò)以下路線合成：

27、

28、式(i)的化合物中的各個(gè)取代基如第一方面所定義。

29、所述的方法包括如下步驟：

30、1)由化合物i-1和化合物i-2制備化合物i-3，通過(guò)親核取代反應(yīng)并脫去一分子溴化氫得到；

31、2)在縮合劑和堿的存在下，化合物i-3與化合物linker—c通過(guò)酰胺縮合反應(yīng)，制備化合物i-4。

32、優(yōu)選地，所述的步驟1)中，化合物i-1和化合物i-2的摩爾比為0.8～1:2；所述步驟2)中，化合物i-3和化合物linker—c的摩爾比為0.8～1:2。

33、優(yōu)選地，所述的步驟1)中，取代反應(yīng)的溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為0～6h；所述步驟2)中，酰胺縮合反應(yīng)的溫度為室溫，反應(yīng)時(shí)間為2～8h。

34、優(yōu)選地，所述的步驟2)中，酰胺縮合反應(yīng)的縮合劑為hoat、hobt、hatu、hbtu或bop中的一種或幾種；所述酰胺縮合反應(yīng)的堿為n,n-二異丙基乙胺dipea或三乙胺tea中的一種或兩種；所述酰胺縮合反應(yīng)的有機(jī)溶劑為四氫呋喃、乙腈、n,n-二甲基甲酰胺或二甲亞砜中的一種或幾種。

35、優(yōu)選地，

36、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為(4-乙基哌啶-1-基)(4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯基)甲酮(lbj-1)時(shí)，其制備方法包括如下步驟：

37、1)制備4-(2-巰基噻唑-4-基)苯甲酸(探針前體t-1)，反應(yīng)路線如下：

38、

39、將4-(2-溴乙?；?苯甲酸加入乙醇，攪拌至完全溶解，加入二硫代氨基甲酸銨，室溫反應(yīng)3h，得到4-(2-巰基噻唑-4-基)苯甲酸(探針前體t-1)；其中，4-(2-溴乙?；?苯甲酸與二硫代氨基甲酸銨的摩爾比為1：1.15；

40、2)制備4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯甲酸(探針前體t-2)，反應(yīng)路線如下：

41、

42、將探針前體t-1和2-溴-5-硝基噻唑加入乙醇，攪拌至完全溶解，加入乙醇鈉，室溫反應(yīng)4h，得到4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯甲酸(探針前體t-2)；其中，探針前體t-1、2-溴-5-硝基噻唑和乙醇鈉的摩爾比為8.4：10：1；

43、3)制備(4-乙基哌啶-1-基)(4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯基)甲酮(lbj-1)，反應(yīng)路線如下：

44、

45、將探針前體t-2用dcm溶解，依次加入hatu和4-乙炔哌啶鹽酸鹽，完全溶解后滴加dipea，室溫反應(yīng)6h，得到(4-乙基哌啶-1-基)(4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯基)甲酮(lbj-1)；其中，探針前體t-2、hatu、4-乙炔哌啶鹽酸鹽和dipea的摩爾比為1：1.4：1：2.3。

46、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(2-甲基丁-3-炔-2-基)-4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯甲酰胺(lbj-2)時(shí)，合成方法同lbj-1，區(qū)別在于將原料4-乙炔哌啶鹽酸鹽替換成原料2-甲基-3-丁炔-2-胺。

47、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)-n-(丙-2-炔-1-基)苯甲酰胺(lbj-3)時(shí)，合成方法同lbj-1，區(qū)別在于將原料4-乙炔哌啶鹽酸鹽替換成原料丙-2-炔-1-胺。

48、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為4-(2-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)-n-(戊-4-炔-1-基)苯甲酰胺(lbj-4)時(shí)，合成方法同lbj-1，區(qū)別在于將原料4-乙炔哌啶鹽酸鹽替換成原料戊-4-炔-1-胺鹽酸鹽。

49、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(2-疊氮乙基)-4-(2-(5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-4-基)苯甲酰胺(lbj-5)時(shí)，合成方法同lbj-1，區(qū)別在于將原料4-乙炔哌啶鹽酸鹽替換成原料2-疊氮乙胺。

50、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)十一碳-10-烯酰胺(lbj-6)時(shí)，制備路線如下：

51、

52、制備方法：

53、1)2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、2-溴-5-硝基噻唑和乙醇鈉加入乙醇溶解，室溫反應(yīng)2h，得到探針前體t-5；其中，2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、2-溴-5-硝基噻唑和乙醇鈉的摩爾比為1：0.9：1；

54、2)將步驟1)得到的探針前體t-5與十一碳-10-炔酸、hatu和dipea，用dmf溶解后，加熱40℃反應(yīng)5h，得到n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)十一碳-10-烯酰胺(lbj-6)。其中，探針前體t-5、十一碳-10-炔酸、hatu和dipea的摩爾比為1：1：2.5：2。

55、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)辛-7-酰胺(lbj-7)時(shí)，合成方法同lbj-6，區(qū)別在于將原料十一碳-10-炔酸替換成原料辛-7-炔酸。

56、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)庚-6-酰亞胺(lbj-8)時(shí)，合成方法同lbj-6，區(qū)別在于將原料十一碳-10-炔酸替換成原料庚-6-炔酸。

57、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)己-5-酰亞胺(lbj-9)時(shí)，合成方法同lbj-6，區(qū)別在于將原料十一碳-10-炔酸替換成原料己-5-炔酸。

58、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為n-(5-((5-硝基噻唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)戊-4-酰亞胺(lbj-10)時(shí)，合成方法同lbj-6，區(qū)別在于將原料十一碳-10-炔酸替換成原料戊-4-炔酸。

59、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為5-疊氮基-n-(2-(5-硝基噻唑-2-基)硫代)噻唑-5-基)戊酰胺(lbj-11)時(shí)，合成方法同lbj-1，區(qū)別在于將原料4-乙炔哌啶鹽酸鹽替換成原料5-疊氮戊酸。

60、當(dāng)如式(i)所示結(jié)構(gòu)的含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針為3-(環(huán)丙-2-烯-1-基)-n-(5-((5-硝基惡唑-2-基)硫代)-1,3,4-噻二唑-2-基)丙酰胺(lbj-12)時(shí)，合成方法同lbj-6，區(qū)別在于將原料十一碳-10-炔酸替換成原料3-(環(huán)丙-2-烯-1-基)丙酸。

61、本發(fā)明的第三方面提供了如第一方面所述的一類含有硫醚結(jié)構(gòu)的靶向phgdh活性分子探針在鑒定靶向phgdh抑制劑與phgdh蛋白的相互作用中的應(yīng)用。所述的活性分子探針的報(bào)告基團(tuán)可以選自：生物素、fitc等熒光基團(tuán)、用于生物正交click反應(yīng)的疊氮化物或炔基，以及反電子需求diels-alder反應(yīng)中的張力烯烴和四嗪中的任意一種。

62、所述的靶向phgdh活性分子探針通過(guò)click生物正交反應(yīng)標(biāo)記phgdh靶標(biāo)蛋白。

63、click生物正交反應(yīng)是一種非自然的化學(xué)反應(yīng)，能夠在生物系統(tǒng)中進(jìn)行，且參與反應(yīng)的分子不會(huì)與其他生物分子發(fā)生反應(yīng)，因此具有高度的選擇性。click反應(yīng)廣泛應(yīng)用于探針標(biāo)記、目標(biāo)蛋白鑒定和細(xì)胞成像等研究領(lǐng)域。click反應(yīng)的典型步驟包括：

64、反應(yīng)物的選擇：通常選擇具有“點(diǎn)擊反應(yīng)”性質(zhì)的分子，這些分子包含具備生物正交性(即不會(huì)與細(xì)胞內(nèi)其他生物分子反應(yīng))的官能團(tuán)，如疊氮基(azide)和炔基(alkyne)。這些基團(tuán)的特異性使得它們能夠在生物環(huán)境中進(jìn)行精準(zhǔn)反應(yīng)。

65、反應(yīng)條件的設(shè)置：常用的click反應(yīng)類型是銅催化的疊氮-炔基反應(yīng)(cuaac)，該反應(yīng)在水溶液中進(jìn)行，具有高效、選擇性強(qiáng)的特點(diǎn)。反應(yīng)通常需要在適當(dāng)?shù)膒h條件下，且在銅離子的催化下進(jìn)行。

66、連接反應(yīng)：通過(guò)click反應(yīng)，將含有炔基或疊氮基的探針?lè)肿优c靶分子(如蛋白質(zhì))或其他生物大分子進(jìn)行高效標(biāo)記或連接。這一過(guò)程能夠確保目標(biāo)蛋白在細(xì)胞或組織中的標(biāo)記精確并可追蹤。

67、分離與分析：反應(yīng)完成后，通過(guò)色譜、質(zhì)譜、熒光成像等技術(shù)分離和檢測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物。探針標(biāo)記的蛋白可以通過(guò)熒光或放射性標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)，從而識(shí)別蛋白質(zhì)的結(jié)合和相互作用。

68、在本發(fā)明的click生物正交反應(yīng)中，phgdh分子探針的主要作用是標(biāo)記并鑒定靶向phgdh抑制劑與phgdh蛋白的相互作用。通過(guò)合成含有適當(dāng)化學(xué)基團(tuán)的硫醚骨架探針，可以在細(xì)胞或組織中與phgdh蛋白或相關(guān)靶標(biāo)發(fā)生正交反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)對(duì)靶蛋白的高效標(biāo)記和鑒定。

69、例如，在本發(fā)明實(shí)施例17中，phgdh分子探針lbj-5通過(guò)免疫熒光共標(biāo)記法驗(yàn)證了靶標(biāo)結(jié)合特性。lbj-5探針含有炔基基團(tuán)，能夠與疊氮基標(biāo)記的熒光分子發(fā)生click反應(yīng)(cuaac)。這一反應(yīng)在探針結(jié)合的靶標(biāo)蛋白上引入熒光基團(tuán)，使靶標(biāo)蛋白在熒光顯微鏡下顯現(xiàn)特定的熒光信號(hào)。通過(guò)免疫熒光共標(biāo)記法，實(shí)驗(yàn)中首先標(biāo)記了phgdh蛋白，并引入了熒光信號(hào)。隨后，與lbj-5探針?lè)磻?yīng)后，觀察熒光信號(hào)的共定位情況。如果兩個(gè)熒光信號(hào)在顯微鏡下高度重疊或完全重合，表明lbj-5與靶蛋白phgdh發(fā)生了特異性結(jié)合，lbj-5具有良好在靶性。

70、除非另外說(shuō)明，在說(shuō)明書和權(quán)利要求中使用的以下術(shù)語(yǔ)具有下面討論的含義：

71、術(shù)語(yǔ)“芳香環(huán)”指含有1-12個(gè)碳原子的單環(huán)或稠合多環(huán)或聯(lián)苯基團(tuán)，具有完全的共軛π電子系統(tǒng)。芳香環(huán)的非限制性實(shí)例有苯基、萘基和聯(lián)苯，芳香環(huán)可以是取代的或未取代的。

72、術(shù)語(yǔ)“芳雜環(huán)”指含有1-6個(gè)原子的單環(huán)體系，體系含有一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或四個(gè)為n、o或s的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子是c，并具有完全的共軛π電子系統(tǒng)。未取代的芳雜環(huán)非限制性實(shí)例包括吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、噻二唑、吡唑、吡啶、嘧啶、四唑和三嗪。芳雜環(huán)可以是取代的或未取代的。

73、術(shù)語(yǔ)“烷基”表示1-20個(gè)碳原子的飽和的脂烴基，包括直鏈和支鏈基團(tuán)。烷基可以是取代的或未取代的。當(dāng)是取代的烷基時(shí)，該取代基優(yōu)選是一或多個(gè)。

74、術(shù)語(yǔ)“烷氧基”表示-o-(未取代的烷基)和-o-(未取代的環(huán)烷基)。代表性實(shí)例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基等。

75、術(shù)語(yǔ)“三氟甲基”表示-cf3基團(tuán)。

76、術(shù)語(yǔ)“硝基”表示-no2基團(tuán)。

77、術(shù)語(yǔ)“氰基”表示-cn基團(tuán)。

78、術(shù)語(yǔ)“羰基”表示-c＝o基團(tuán)。

79、術(shù)語(yǔ)“羧基”表示-cooh基團(tuán)。

80、術(shù)語(yǔ)“苯甲?；哙ぁ北硎净鶊F(tuán)。

81、術(shù)語(yǔ)“苯甲酰胺”表示基團(tuán)。

82、術(shù)語(yǔ)“疊氮化物”表示帶有-n3基團(tuán)的化合物結(jié)構(gòu)。

83、術(shù)語(yǔ)“炔基”表示-c≡ch基團(tuán)。

84、術(shù)語(yǔ)“張力烯烴”表示環(huán)狀烯烴基團(tuán)，如等。

85、術(shù)語(yǔ)“四嗪”表示基團(tuán)。

86、術(shù)語(yǔ)“鹵素”表示氟、氯、溴或碘，優(yōu)選為氟、氯、溴。

87、術(shù)語(yǔ)“peg鏈”表示由一系列乙二醇單元(-o-ch2-ch2-)組成的聚合物鏈。

88、術(shù)語(yǔ)“飽和碳鏈”表示碳鏈中所有碳原子之間通過(guò)單鍵相連，沒(méi)有雙鍵或三鍵的碳鏈結(jié)構(gòu)。

89、術(shù)語(yǔ)“不飽和碳鏈”表示碳鏈中存在一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵(如碳碳雙鍵或碳碳三鍵)的碳鏈結(jié)構(gòu)。

90、本發(fā)明具有如下技術(shù)效果：本發(fā)明提供了一種新型硫醚骨架phgdh分子探針，該探針通過(guò)click生物正交反應(yīng)技術(shù)能夠高效、特異性地標(biāo)記靶蛋白phgdh，并鑒定靶向phgdh抑制劑與phgdh蛋白的相互作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的探針具有較高的選擇性和準(zhǔn)確性，能夠在復(fù)雜的生物體系中有效標(biāo)記并鑒定目標(biāo)蛋白，從而顯著提高了蛋白質(zhì)相互作用分析的效率。此外，通過(guò)免疫熒光共標(biāo)記法，能夠直觀觀察探針與靶蛋白的結(jié)合情況，進(jìn)一步驗(yàn)證抑制劑的在靶性。本發(fā)明還通過(guò)結(jié)構(gòu)修飾豐富了phgdh分子探針的結(jié)構(gòu)類型，為phgdh靶點(diǎn)的深入研究提供了新的工具，推動(dòng)了靶向phgdh的抑制劑篩選及其在抗腫瘤和代謝疾病中的應(yīng)用。