1.一種hla基因的擴增引物,其特征在于,所述擴增引物包含如下九組引物中的任意一組或任意多組的組合物:其中,
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擴增引物,其特征在于,所述九組引物中,各組引物內(nèi)上游引物和下游引物間的摩爾比為:(0.9~1.1):(0.9~1.1)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的擴增引物,其特征在于,所述擴增引物為所述九組引物中的任意多組的組合物;所述組合物中,各組引物間的摩爾比為:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的擴增引物,其特征在于,所述擴增引物的5’端含有標簽序列。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的擴增引物,其特征在于,所述標簽序列為6~10bp寡核苷酸序列。
6.一種試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權(quán)利要求1-5中任一項所述的擴增引物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括如下任意一種或多種試劑:pcr擴增試劑、基因純化試劑、測序文庫構(gòu)建試劑或測序試劑;其中,所述pcr擴增試劑包括:水、dntp、dna聚合酶和dna聚合酶緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒,其特征在于,所述dna聚合酶選自如下任意一種:kodfx?neo、kod?-multi?&?epi-、kod?fx、kod?onetm?pcr?master?mix或kod?-plus-?neo。
9.一種hla基因pcr擴增的方法,其特征在于,所述方法包括:采用權(quán)利要求1-5中任一項所述的擴增引物進行pcr擴增,得到所述hla基因擴增產(chǎn)物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述pcr擴增的反應(yīng)程序選自如下任意一種:
11.一種hla基因測序文庫的構(gòu)建方法,其特征在于,所述構(gòu)建方法包括:將hla基因的擴增產(chǎn)物與測序接頭連接,得到所述hla基因測序文庫;
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的構(gòu)建方法,其特征在于,將所述擴增產(chǎn)物與所述測序接頭連接之前,所述構(gòu)建方法還包括:對所述擴增產(chǎn)物進行純化。
13.一種hla基因測序方法,其特征在于,所述hla基因測序方法包括:對測序文庫進行測序;所述測序文庫為采用權(quán)利要求11或12所述的hla基因測序文庫的構(gòu)建方法構(gòu)建的測序文庫。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的測序方法,其特征在于,所述測序采用三代測序技術(shù)。
15.一種hla基因分型檢測方法,其特征在于,所述hla基因分型檢測方法包括:采用權(quán)利要求13或14所述的hla基因測序方法對hla基因型進行檢測并分型。
16.一種權(quán)利要求1-5中任一項所述的擴增引物或權(quán)利要求6-8中任一項所述的試劑盒在制備hla基因分型檢測試劑中的應(yīng)用。
17.一種權(quán)利要求1-5中任一項所述的擴增引物或權(quán)利要求6-8中任一項所述的試劑盒或權(quán)利要求9-10中任一項所述的hla基因pcr擴增的方法或權(quán)利要求11或12所述的hla基因測序文庫的構(gòu)建方法或權(quán)利要求13或14所述的hla基因測序方法或權(quán)利要求15所述的hla基因分型檢測方法在hla基因分型中的應(yīng)用。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的應(yīng)用,其特征在于,所述hla基因分型依次包括如下步驟:hla基因擴增、hla基因測序文庫構(gòu)建、hla基因測序和hla基因分型判定。